牙鲆产卵和孵化

1.产卵

通过1年以上室内驯化养殖的亲鱼,采取人工调控环境条 件,进行营养强化培育,生殖腺能正常发育。在人工控制调节的 条件下,经过45天以上的培育,性腺即可达到发育成熟,进行自 然产卵受精。现在亲鱼培育技术比较成熟,通过调节亲鱼培育 的环境条件,采用合理的环境刺激,促使牙鲆亲鱼自然排放精 卵,可以满足苗种繁育所需的优质受精卵。

牙鲆为多次产卵种类,其产卵量与鱼的大小以及性腺发育 程度有关,每尾亲鱼每次产卵数万至二三十万粒。牙鲆自然产 卵顺畅,一般不需通过特别调节进行催产。经验丰富的养殖人 员通过观察即可确定性成熟产卵时间,当雌鱼生殖腺已明显膨 大,用手触摸腹部有柔软感,且生殖孔红肿,但未产卵,可以挤出 部分卵但质量较差,而雄性挤出乳白色精液镜检发现精子活泼。 这时可以采取人工调节环境变化,进行环境条件刺激催产,促进 亲鱼自然排放卵子和精子,常用的方法有水流刺激和温差刺激 的方式。流水刺激是在每次排水时,当水位排到最低点后,通过 强水流加水排水的方法,通过流水刺激鱼体,促进其性腺成熟排 放精卵。温差刺激是通过短时间的升温或降温,改变亲鱼培养 温度,然后再回到培养温度,刺激亲鱼排放精卵,达到催产的目 的。

牙鲆产卵一般在夜间,开始产卵的第5~7天是排卵量和受 精率最高的阶段。3龄以及以上的亲鱼排卵量可达200万枚。 牙鲆性腺为分批成熟,多次产卵。在产卵初期所产的卵,受精率 及孵化率都较低,一般不予采用。产卵盛期再开始集卵、孵化。

牙鲆的卵为浮性卵,一般采用溢水孔或虹吸表层水的办法 收集浮性受精卵,也可结合用筛绢网捞取。当亲鱼在培育池中 自然产卵时,在产卵池溢水口处安放用80目筛绢做的网箱接 卵。网箱放在桶里,多余的水从桶上面溢出,卵则留在网箱内。 因产卵池水中杂质较多,为保持孵化时的水质清洁,最好用手抄 网将较粗杂质捞走。然后停止流水,静置一段时间,待死卵、坏 卵下沉后,再将浮在上面的卵捞起,用清洁的海水冲洗后放到孵 化器中孵化。

2.受精卵的计数

(1)容量计数法:将收集到的受精卵放在一定容量的水槽中 定容,充气搅匀后,用100毫升的烧杯在不同处随机取样3次, 全量计数,然后推算出水槽中的卵数。

(2)重量计数法:用80目的筛绢捞取卵子,滤去水后称重, 每克受精卵为1 200~1 600枚,即按1 200~1 600粒/克或每千 克120万粒算出卵子的数量。

3.受精卵的运输

可采用聚乙烯塑料袋或帆布桶运输。

(1)聚乙烯塑料袋:装入容量50%~70%的洁净沙滤海水 (温度与产卵池水温相同),放卵密度1万~2万/升,充氧后扎 好口,放入泡沫塑料箱中。气温高时塑料袋周围放置冰块或其 他降温材料,以防止运输途中温度升高。封箱后用飞机或汽车 运输。

(2)帆布桶或水槽:装入约2/3的水,将装在聚乙烯塑料袋 中的受精卵充氧后扎好口,放在装好水的帆布桶或水槽中,用卡 车运输,运输途中避光并防止运输途中水温升高。

以上两种方法对当天产的卵子,运输15~20小时可保持较 高的孵化率;对于产出后1~2天的卵子,运输过程的死亡率较 高,孵化后的畸形率也较高。经过运输的受精卵到达目的地后, 立即放入孵化器中静置20~30分钟,吸出下沉的卵,调整水温 后孵化。

4.受精卵孵化

收集上浮的受精卵,用洁净的海水冲洗,除去多余的精子, 然后用10×10-6~15×10-6的碘液药浴消毒3~5分钟,用洁 净的海水冲洗。将处理好的受精卵,放入80目的孵化网箱中孵 化,不间断微量充气(吸底时停气),隔日吸底一次。每日更换部 分新水,换水量为总水体的20%~30%。光照控制在500~ 2 000勒克斯。孵化网箱多为0.2米3左右的四方柱形(0.5米 ×0.5米×1.0米)或圆柱形,一个孵化箱中可放入10万左右粒 受精卵进行孵化。在水温15℃条件下,牙鲆受精卵经过65小 时(2.5日)仔鱼便可破膜而出,完成孵化。初孵仔鱼全长2.21 毫米左右。

牙鲆的发育可分为胚胎发育和胚后发育两个阶段。胚胎发 育是指受精卵从卵裂到仔鱼即将破膜这一段时期,又称卵膜内 发育期。牙鲆胚胎发育时序如表31所示。

(1)孵化设备:牙鲆的孵化方法较简单,可用孵化网箱或孵 化水槽,也可直接在育苗池中孵化。采取一次换水的静水孵化 或流水孵化,微量充气。

 

表31 牙鲆受精卵胚胎发育时序(水温14.6~15.5℃)

 

 

发育期 受精后时间 发育期 受精后时间
2细胞期 

4细胞期

8细胞期

16细胞期

32细胞期

128细胞期

高囊胚期

低囊胚期

原肠初期

胚盾形成期

胚盘下包1/2

1小时50分 

2小时25分

3小时25分

4小时05分

4小时35分

6小时15分

10小时00分

11小时00分

14小时30分

15小时45分

18小时50分

胚盘下包2/3 

视泡期

卵黄栓形成期

克氏囊形成期

胚体绕卵黄1/2

尾芽期

晶体初现

胚体绕卵黄3/5

胚体绕卵黄4/5

孵出期

21小时40分 

22小时00分

27小时10分

33小时40分

34小时40分

43小时20分

44小时30分

50小时40分

57小时40分

63小时30分

 

 

孵化网箱一般为0.5~1米3,深0.6~1.5米,用80目筛绢 制成。孵化水槽多用玻璃钢水槽、强化玻璃钢水槽或聚碳酸酯 水槽,容积0.5~8米3,水深0.8~1米。

(2)孵化条件:

①孵化密度:孵化网箱一般为10万~50万粒/米3,孵化水 槽一般为1万~4万粒/米3

②水温:牙鲆受精卵在水温10~24℃时均可孵化,但适温 为14~16℃,最适水温为15℃左右。水温对牙鲆受精卵的发育 有很大影响,发育孵化速度在适温范围内,随着水温的升高而加 快。通常当水温在22℃以上时,孵化仔鱼的畸形率会急剧升 高。水温在20℃或20℃以上,孵化时间为40小时左右;水温在 15℃左右,孵化时间为50~60小时;水温在10℃时,孵化时间 为150小时以上;如果水温低于10℃,则受精卵很难发育、孵 化。

③盐度:牙鲆受精卵在适宜的水温条件下对盐度的适应性 较强,盐度在25‰~45‰时均可孵化。这一盐度范围内,海水 盐度较高时,受精卵的孵化率相应提高,畸形率降低。用17‰ 以下或用50‰以上的海水孵化,24小时后全部死亡,孵化的最 适盐度是28‰~32‰。

④pH值:pH值在8.0左右牙鲆卵的孵化率较高,碱性较 强的环境会导致孵化仔鱼的畸形率升高,仔鱼的耐酸能力也较 弱,pH值7.5~8.5为宜。

⑤氨氮:水体中的氨氮通常以NH3和NH4+两种形式存 在,NH3对牙鲆有很大的毒性,而NH4+无毒。当NH3浓度超 过0.05×10-6时,牙鲆卵的死亡率急剧升高,畸形率也升高。

⑥溶解氧:要求达到6毫克/升以上,一般微流水或微充气 均可满足。

⑦其他:牙鲆对PO42-和NO3的耐受性较高,PO42-浓度在 50×10-6以内,NO3浓度在100×10-6以内,受精卵都可以孵 化。水体中的S2-、Hg2+对牙鲆卵有极毒作用,浓度达0.05× 10-6~0.1×10-6时,即可对受精卵产生毒性,畸形率可达90% 以上。水中酚含量超过10×10-6,阴离子表面活性剂含量大于 0.5×10-6时,牙鲆受精卵在一日内全部死亡。非离子表面活性 剂的毒性较小,但致畸率却相当强。当水中含量达到0.01× 10-6以上时,孵化仔鱼100%畸形,各种重金属对牙鲆卵也有相 当的毒性。依据不同金属对牙鲆胚胎的滞育、致畸、成活率及孵 化率的影响,得出5种金属对牙鲆胚胎的毒性大小顺序为Cu> Zn>Cd>Pb>Cr。

(3)日常管理:孵化期间每天记录水温变化,保持水温稳定。 经常在显微镜下观察胚胎发育情况,并做好记录。孵化过程中, 死亡的卵发白下沉。因此,每天应将沉到底部的死卵吸出,并添 加适量的新水,以防水质变坏。孵化过程中最好能微量充气,但 充气量不能过大,在吸污时要停止充气,以便脏物、死卵下沉。 进水冲击不能过大,防止卵膜破裂。静水孵化时只换水1次,要 用等温新水。如果所用海水的重金属含量较高,可加2~5毫 克/升的EDTA。

(4)孵化仔鱼的计数方法:用100~1 000毫升的烧杯随机 取样3次,计算其中仔鱼数,求出平均值,推算出孵化仔鱼数,求 出孵化率。计算公式为:

 

孵化率=(孵出仔鱼数/受精卵数)×100%