刺参人工育苗浮游幼体的培育

刺参浮游幼体阶段是指从初耳状幼体开始,直至变态到稚 参的阶段。这一阶段的幼体培养管理技术环节包括以下几点:

1.耳状幼体培育密度

耳状幼体投放密度是指初耳状幼体入池培育时的密度,即 每毫升水体内所含初耳幼体的个数。在静水培育条件下,耳状 幼体在水中的分布不均匀,长时间的密聚造成局部微环境溶解 氧、饵料条件恶化,幼体容易出现生长发育缓慢、畸形个体增加 的现象,甚至幼体萎缩,发生糜烂现象。另外,幼体过多密集,容 易成团,下沉池底死亡,进而败坏水质。因此,初耳状幼体培育 密度必须严格控制。培育密度适宜,幼体生长、发育正常,变态 率、成活率均较高。培育初耳幼体的最适密度为0.5个/毫升左 右;如果在充气条件下,密度可以适当加大,一般可控制在1个/ 毫升以下。在适宜范围内,密度越小,幼体个体越大,发育越快, 成活率、变态率越高。

幼体适宜的培育密度随环境条件的不同也有差异,如前期 育苗或者控温育苗,水质条件、饵料条件、天气状况较好,幼体培 育密度可以相对增大;后期育苗水质条件下降,水中原生动物、 敌害动物增多,气温高、雷雨天气、闷热天气增多,幼体密度应相 对减少,通常最好控制在0.5个/毫升以下。另外,幼体培育密 度与幼体饵料有直接关系,饵料质量好、数量足,幼体培育密度 可增大,饵料质量差、数量不足,幼体密度相对减少,以盐藻、角 毛藻、小硅藻混合投饵,幼体培育密度可增加,一般可以维持在 0.7个/毫升左右;以金藻、小球藻及人工代用饵料、人工配合饵 料为饵料,幼体培育密度适当减少,一般应控制在0.5个/毫升 以下。

2.水温控制

温度对幼体的发育有非常重要的作用,温度太低,幼体会发 育缓慢,畸形率高,成活率低;温度太高,水体中的细菌等有害生 物容易大量繁殖,对幼体的正常发育有很大影响,而且幼体的畸 形率也会增加,幼体成活率明显降低。

20℃幼体发育正常,第八天发育至大耳幼体,第九天出现樽 形,第十一天大量变为稚参,成活率19.7%。研究表明,刺参的 浮游幼体在18~22℃发育正常,培育中应将水温控制在20℃左 右为最佳,而且换水前后的温差不要超过1℃。

3.池水充气、搅拌

在静水培育条件下,刺参的耳状幼体多集中于水体最表层。 在一般情况下,10厘米水深处幼体密度已经很小,30厘米以下 的水层很少发现幼体的存在。由于耳状幼体密集于水体表层, 常常会结团。在靠近池壁的最表层水体中,幼体结团现象尤其 严重,甚至互相连接成长条状。这样耳状幼体所处的生态环境 必然会急剧恶化。幼体集结于表层的现象,从初期耳状幼体开 始,可以一直持续到大耳状幼体后期。这种现象可造成耳状幼 体大量死亡或发育不良。因此,在幼体培育期间需要保证幼体 能在整个池中均匀分布,通常采用充气或搅拌的办法,正常密度 下每小时搅拌一次。用搅耙在池子的上、中层轻轻搅动水体,使 幼体均匀分布。按培育池的底面积每3~5米2放一个气石,气 量不能太大,应采取微充气的方法。因为气量过大,容易将池底 沉积的污物泛起,对水质造成影响,同时容易发生气泡病,造成 幼体的死亡。

4.幼体的饵料投喂

刺参幼体发育至小耳幼体,消化道已经打通,即可摄食。刺 参幼体的摄食方式是靠围口纤毛的摆动,形成一定的水流,悬浮 在水中的单细胞藻类和其他微小有机碎屑随着水流通过口送入 消化道中。育苗过程中,一般在幼体选优之后立即投饵。

(1)饵料种类。

①单细胞藻类:首先选用的品种有盐藻、牟氏角毛藻。盐藻 个体小,易于消化,适宜的繁殖水温为20~25℃,与耳状幼体适 宜培育水温18~28℃吻合;角毛藻个体小、悬浮性强、细胞壁 薄,幼体对其消化、吸收能力强。这两种单细胞藻类作为饵料, 耳状幼体摄食后的消化吸收效果特别好,饵料进入胃内以后在 极短的时间内,甚至不足1分钟就能消化,透过幼体的胃已看不 清楚完整的藻类的形状。其次选用的品种有三角褐指藻、小新 月菱形藻、中肋骨条藻等,这几种饵料都具有个体小、活动力弱、 适宜高密度大面积培养等特点,而且饵料本身利于幼体的摄食, 消化吸收效果也很好。金藻类(湛江叉鞭金藻、单边金藻、等边 金藻等)耳状幼体摄食后消化能力较弱,大多数被排出体外。效 果最差的是扁藻、小球藻、微绿藻等。刺参幼体的最适合单细胞 藻类饵料为盐藻和角毛藻,可以一直单独投喂;湛江叉鞭金藻、 单边金藻、等边金藻等品种短时间内可以使用,但不能长期单独 投喂,尤其是刺参幼体发育到中耳状幼体以后;扁藻、小球藻、微 绿藻等,在耳状幼体培育期间不适宜投喂使用,只能是在饵料紧 缺时偶尔使用。另外,由于不同种类单细胞藻类混合投喂的效 果要比单独投喂的效果好,所以在实际人工育苗中,可以盐藻和 角毛藻为主,配合投喂一些其他种类的单细胞藻类,如三角褐指 藻、小新月菱形藻、叉鞭金藻等。

②代用饵料:在育苗过程中由于气候变化、水质变化或敌害 生物、原生动物的不良影响,有时候会使藻类无法正常培育和繁 殖,幼体的饵料得不到足够的保证,严重时直接影响育苗工作的 顺利进行。因此,在苗种生产过程中代用饵料是必不可少的,主 要有海洋红酵母、面包酵母、大叶藻粉碎液等。海洋红酵母个体 小,一般3~6微米,面包酵母为5~10微米。这两种酵母悬浮 性和浮游性都很强,在海水中的分布均匀不易下沉,投喂24小 时后有利于幼体摄食。幼体摄食后酵母细胞在胃内分布均匀, 消化正常。大叶藻粉碎液是将大叶藻粉碎后加以过滤的藻液, 主要成分为大叶藻的有机物碎屑,发酵后由细菌和真菌分解释 放的可溶性胶性物质,以及细菌、真菌本身,都是幼体易于摄食、 消化、吸收的饵料。

此外,还有专用的人工配合饵料。

(2)投饵量。投饵在换水后进行,投饵后立即轻轻搅动池 水,使饵料在池内尽量分布均匀。不同发育时期的耳状幼体,对 饵料的需求量也不同。随着个体的生长、发育、摄食量的增加, 投饵量也应相应增加。同一时期的幼体摄食不同品种的饵料, 对饵料的数量要求也不同。投饵量的多少,对幼体发育、生长和 变态有明显的影响(表8),必须掌握好幼体饵料的投喂量。投 喂单细胞藻类按培育水体计算投喂量,小耳状幼体每天投饵3 ~4次,日投饵量2万个细胞/毫升;中耳状幼体每天投喂3~4 次,日投喂量2.5万~3万个细胞/毫升;大耳状幼体每天投喂4 次,日投喂量4万个细胞/毫升。

投饵量的掌握还应根据当天检查幼体胃含物的具体情况进 行适当增减。投饵前取样观察,胃内饵料较多、胃液色浓、胃形 饱满;同时显微镜下观察培育水体内单细胞藻类的数量,一个视 野1~3个细胞,表明投饵量适宜,可维持原来的投饵量。若发 现幼体胃内饵料量减少,胃液色淡或镜检观察难以发现培育水 中的单细胞藻类,表示饵料缺乏,须适当增加投饵量。

 

表8 不同投饵量培育幼体的试验结果

缸号 培育 

水体

(升)

投饵量 

(个/

毫升)

幼体密 

度(个/

毫升)

稚参 

(头)

成活 

(%)

平均 

成活率

(%)

出苗量 

(头/

升)

平均 

出苗量

(头/升)

1 10 5 000 1.3 591 4.55 59.1 2.4 31.5
2 10 32 0.25 3.2
3 10 3 000 137 1.54 13.7 1.0 9.9
4 10 60 0.46 6.0
5 10 1 000 55 0.42 5.5 0.23 3.0
6 10 5 0.04 0.5

 

 

投喂单细胞藻类还应注意饵料的质量,包括饵料培养浓度 和原生动物的污染程度。一般三角褐指藻、小新月菱形藻的浓 度在200万个细胞/毫升以上,角毛藻、盐藻、金藻等的浓度在 100万个细胞/毫升以上。要求无老化的藻体,原生动物污染 轻。若单细胞藻类饵料培养浓度过小,日投饵量超过培育水体 的5%,或者原生动物污染严重,显微镜下观察一个视野原生动 物的数量达到10个以上,则说明饵料培育质量不好,尽量不要 投喂,或者是少投喂。代用饵料的投喂,海洋酵母日投饵量为2 ×105个细胞,面包酵母每天投饵量10~15毫克/千克。投喂 大叶藻粉碎发酵液需预先制备,方法是取3千克左右的鲜大叶 藻,粉碎后置于容积150升注满过滤海水的水槽内,自然发酵 10天即可投喂。投饵时,将发酵液充分搅拌后经SP56号筛绢 过滤,日投饵量2升/米3。人工配合饵料按照说明书的要求进 行投喂。

(3)投喂方法。以少投勤投为宜,一般每天分4~6次进行 投喂,应对饵料的质量严格把关,避免投喂培育时间过长的老化 的饵料,原生动物感染严重的饵料也不能投喂,否则会引起培育 池内原生动物的大量繁殖,影响幼体摄食而发育不良。饵料投 喂最好在每天换水结束后,随着注入培育池的新鲜海水一起加 进去。刚换完水时幼体在池中分散较均匀,随水加入的饵料分 散到全池各处,幼体得到大致相同的摄食机会。若待注水后投 喂,可将饵料均匀地泼洒到池中,因幼体多集中于水的中上层, 泼洒的饵料也多落于水的中上层,有利于幼体摄食。

5.水质的管理

(1)换水。在培育幼体过程中,幼体在水中不断地排出新陈 代谢的产物并消耗水中的溶解氧,同时死亡的幼体和饵料等也 会逐渐腐败分解,并释放出有害物质。培育水温较高,水中的细 菌很容易大量繁殖;每天不断的投饵,藻液中会带入一些营养 盐、饵料代谢产生的有毒物质。这些因素都会使水质持续恶化, 影响幼体的正常发育、生长和变态,严重时幼体死亡,造成整个 育苗生产的失败。只有每天更换新鲜过滤海水,才能保持培育 池中水质的指标良好。一般幼体培育水的溶解氧要求在4.2~ 5.9毫升/升。

幼体刚刚选育后的2~3天水质比较新鲜,个体也小,饵料 投喂量较少而且积蓄不多,可采用添水的办法改善水质。开始 培育池只加入1/2左右的海水,每天加入新鲜海水10~15厘米 深(也可以分上午、下午两次添加)。等培育池注满水之后再开 始换水,一般每天换水早晚各一次,温度较低时可以每天换水一 次,每次换水量为池水的1/3~1/2。也可以采取流水培育的方 法,即从培育池的一端注入海水,同时从另一端排水,使整个培 育池的水一直处于流动状态,只在投饵后停止流水1小时左右, 但这种方法成本较高。无论哪种方法,在培育池池水更新过程 中都应避免幼体的流失,尽量减少幼体损伤。

为避免换水时幼体的流失,应选用合适的筛绢作为网箱进 行换水。网箱一般制成方形或圆形,可根据培育池的大小来确 定网箱规格,太大操作不便,太小容易对幼体造成伤害。网箱应 按所需尺寸固定在框架上,框架起支撑作用,一般用塑料管或钢 筋焊接而成,框架的大小要略大于网箱的大小。筛绢的选用特 别注意,即筛绢网目对角线的长度必须小于幼体的宽度。刚开 始可以选用目数较大的筛绢,一般为200目,随着幼体的生长可 以选用目数较小的筛绢。把网箱放入培育池中,应注意网箱上 口应高于培育池的水面,使网箱只能进水,不能进幼体。然后从 网箱的上口把3~5厘米的橡胶管或聚乙烯管插入网箱水中,用 虹吸的方法将培育池内的水经过网箱排出池外。由于幼体的浮 游能力较弱,很容易附在网箱的外壁上,吸力越大幼体附壁现象 越明显,幼体往往因为挤压而死亡。因此,在换水过程中,必须 不断轻轻搅动网箱内的水,以减少网箱周围幼体的密度。另外, 换水管排水口的位置不能比培育池表面低得太多,否则,因虹吸 作用使吸力过大、水流太急,幼体容易附壁造成死亡和损伤;换 水管进水口应放在网箱中央,不能靠在网箱内壁上。

流水培育水交换原理基本相同,但池外需要设置一个控制 溢水位的容器,或者在培育池壁上增设一个控制水位摇臂,以保 持池内的水位,防止水位过高溢出或池水流出过多。有些单位 则采用过滤棒,即在一个多孔的粗聚乙烯管(直径为16~40厘 米)的外面包上换水筛绢。其塑料管一段封闭,另一端接软橡胶 皮管,过滤棒放于培育池底,将橡胶管的另一端留在池外,用虹 吸法把池内的水通过过滤棒、软管排出。

 

培育前期,每天进行两次换水,每次的换水量为培育水体的 1/3。培育后期每天换水2~3次,每次的换水量为培育水体的 1/2,在具体培育过程中视水质情况可适当进行调整。流水培育 由于流水时间长、流速缓,幼体贴附筛绢壁上的情况并不严重, 能减少幼体的死亡率。培育前期日流水量可控制在1个量程左 右,后期可增至1.5~2个量程。

(2)清池和倒池。在幼体培育过程中,由于幼体的新陈代谢 产生的排泄物、幼体的死亡个体、老化沉淀的饵料、培育池中繁 生的原生动物等,以及海水中带来的悬浮物质不断沉到池底,长 期积累腐烂后容易产生有害的物质(如氨、硫化氢),败坏水质、 滋生细菌。如不及时清除,会影响幼体发育,甚至导致幼体死 亡,必须及时彻底清除池底的污物,可以采用清池和倒池的方 法。①清池:清池采用虹吸法吸取池底的污物,具体操作方法是 将吸底管插到池底,用吸管将池底吸干净,一般2~3天吸一次 底。吸底时有可能吸走一部分正常幼体,在吸底管的出口应接 网箱,用网箱收集吸底管吸出来的正常幼体。吸底完毕后将网 箱中收集的幼体集中到一个干净的水槽中,使水槽中的海水静 止一段时间,正常的幼体会浮游在水的上层。这时可将水槽中 的上清液连同正常的幼体倒回培育池中,水槽中剩余的部分再 沉淀澄清后,将上清液及幼体倒回培育池。反复几次,就可将吸 出的幼体绝大部分收回到培育池中。在充气培育条件下,清底 前应先停止充气,健康幼体会很快自动地上浮到水的表层和上 层,此时进行清底将会大大减少幼体的损伤和损失。

②倒池:清池的方法不能彻底清除池底的污物,还可以采用 倒池的方法来彻底清除池底的污物。倒池往往容易对幼体造成 伤害、影响成活率,所以一般不采用。当幼体因水质恶化而造成 发育不良时,就必须倒池彻底更新水质。倒池法同初耳状幼体 选优时的浓缩法类似,将培育池内的幼体通过虹吸等方法,转入 加有新鲜海水的干净的培育池中进行培育。倒池的方法对幼体 损伤比较严重,但可以比较彻底地更新水质。

在生产实际中采取哪种方法要根据实际情况来确定,如果 培育池的水质比较好,可以采用清池的方法;如果水质比较差或 幼体出现异常现象时,则可以采用倒池的办法来改善幼体的培 育条件。

6.主要环境因子的控制

(1)溶解氧。保持在5毫克/升以上为好。以单细胞藻类为 饵料培育的耳状幼体,通常不会出现溶解氧过低、严重影响幼体 发育的情况,但在雷雨、闷热天气、气压低时,培育水中的溶解氧 的含量就会下降。另外,使用代用饵料培育幼体时,也有可能因 为溶解氧过低(2~3毫克/升)而导致幼体缺氧死亡。在这种情 况下,应注意监测溶解氧的含量的变化,及时更新培育池的池水 或进行充气。

(2)光照。育苗室内光线的强弱,对幼体的生长、发育有着 比较大的影响,在幼体培育过程中应注意光线的控制。光照强 度超过2 000勒克斯幼体具有背光性,会集中在池底,不利于幼 体的生长发育;当光照强度低于2 000勒克斯幼体具有趋光性, 会在培育水的上层和表层浮游。因此,在培育过程中应避免直 射光的照射,室内的光线应当均匀而柔和,适宜的光照强度应在 500~1 500勒克斯。

(3)盐度。刺参幼体适宜的海水的盐度为26.2~32.7。在 适盐范围内,盐度越高发育越快,盐度越低发育越慢。在育苗过 程中当有大量降雨等淡水注入时,应注意监测海水的盐度,但当 盐度过低应不换水或少换水,避免出现幼体的大量死亡。

(4)pH值。要求pH值在8.1~8.3。

(5)混浊度。培育水体中悬浮粒子的混浊度,对幼体发育有 明显的影响。混浊度在200毫克/升时,幼体发育迟缓、成活率 低;150毫克/升时,幼体正常发育受阻、成活率下降;混浊度在 100毫克/升和50毫克/升时,幼体发育、变态正常、成活率高。 试验表明,幼体培育的混浊度不宜超过150毫克/升,应为50~ 100毫克/升。

7.浮游幼体培育日常管理监测指标

耳状幼体是刺参整个生命周期中短暂的一个浮游生活阶 段,幼体浮游一般需10天左右,之后经变态发育为稚参,转为永 久的底栖生活。浮游时期幼体发育正常与否,对于变态至稚参 的成活率有直接影响。在11~13天幼体培育期间必须及时、定 时用显微镜进行检查,一般每天各培育池至少应镜检一次,观察 和掌握幼体活动、摄食、发育、生长、成活的情况,及时发现问题 解决问题。从初耳幼体到大耳幼体一般需要经历7~8天,同时 也是幼体的病害易发期,耳状幼体发育正常与否,对幼体变态至 稚参的成活率起着至关重要的作用。掌握了解耳状幼体的摄 食、发育、生长情况尤其重要。耳状幼体发育是否正常,可参考 以下监测指标。

(1)幼体体长增长。耳状幼体正常体长,初耳幼体450~ 600微米,中耳幼体600~700微米,大耳幼体800~1 000微米。 耳状幼体体长日增长平均达50微米即属正常,若增长明显低于 50微米则属不正常,应查找原因及时解决。

(2)幼体外部形态。耳状幼体左右对称,前后比例适宜。幼 体臂随着发育而粗壮、突出、弯曲明显,否则畸形,幼体多夭折。 造成畸形的主要原因:受精卵的质量不良;培育水体理化因子超 标;管理操作不慎,尤其是换水时幼体贴附于网箱壁上,重者死 亡,轻者容易导致幼体畸形。

(3)胃的形状。耳状幼体胃的外观呈犁状,丰满胃壁薄而透 明,胃内有饵料时胃液颜色较深,饵料不断由食道输入胃内。若 胃壁增厚、粗糙,胃形狭窄,胃肠萎缩、不清晰则属不正常,应立 即查找原因及时解决,否则胃将在几小时内发生糜烂。

(4)水体腔发育。初耳幼体期在胃的左上方有一圆囊为水 体腔。中耳幼体期水体腔为拉长的囊状并分为前、后两个腔,随 着幼体发育后面的腔逐渐变成半环构造,围绕在食道周围。大 耳幼体体腔出现2~3个凹面,凹面向着食道,凸面向外侧。发 育至大耳幼体后期,出现指状五触手原基和辐射水管原基。水 体腔发育迟缓或者不发育,属不正常。

(5)球状体的出现。幼体发育至大耳状幼体后期,身体两侧 出现对称、透亮的5对球状体。

(6)樽形幼体。主要特征是5个指状的触手可以从幼体前 端的前庭中自由伸出,之后触手发育是继续增多并呈树枝状分 支。樽形和五触手幼体阶段持续时间不长,一般1~2天。樽形 幼体期不摄食,只要耳状幼体发育变态正常,樽形幼体和五触手 幼体多数能正常变态发育至稚参。